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Contrôle qualité par microscopie électroniquePrésentationLe service de contrôle qualité par coloration négative permet de :
Mots clésMicroscopie électronique, coloration négative, homogénéité. Effectif dédié
EquipementMicroscope électronique FEI Tecnai12 120kV LaB6 avec 1 caméra GATAN Orius 1000
Accessibilité et coûtsAcadémiques membres du PSB, autres académiques et industriels selon tarifs. Comment nous contacter ?Envoyer un courriel à : ibs-plateforme-em.contact ibs.fr EchantillonsLa taille minimale est de 100 kDa. Il est préférable d’éviter la présence de détergent et de glycérol. La quantité minimum à fournir est de 30 microlitres d’échantillon à environ 0,2 mg/ml et 100 microlitres de tampon pour diluer. Suite à l’observation, les échantillons sont soit récupérés par le client, soit conservés 2 semaines au maximum, puis jetés. Les échantillons doivent être purs . Les échantillons doivent respecter le niveau de sécurité L1 ou L2 (à condition d’avoir été préalablement fixés) et être conformes à la déclaration OGM correspondante. Les images obtenues par la plateforme peuvent être utilisées dans des communications techniques sauf avis contraire du client. ProcédurePour une première observation, au moins 2 colorants sont testés :
Après préparation de la grille par coloration négative (technique de « flottaison » de carbone ou coloration sur grilles carbonées), 5 champs différents répartis sur la grille sont observés. Au minimum 10 photos sont prises pour représenter l’échantillon. Le grandissement peut varier de 10000x à 60000x suivant l’échantillon (sauf cas particulier). RésultatsAprès observation, l’expérimentateur envoie un bilan (via le serveur ftp du CEA ou sur le site intranet de l’IBS) contenant les photos les plus représentatives de l’échantillon avec un commentaire validé par le responsable de la plateforme. L’ensemble des images peut être mis à disposition sur demande. Le délai d’obtention du bilan est de trois semaines ouvrées maximum à partir de la réception des échantillons (sauf dans le cas d’une panne de l’instrument). Stockage des donnéesLes données sont stockées 3 ans. Suivi valorisationSi vous utilisez ces résultats (dans le cadre de la plateforme ou d’une collaboration) merci de rajouter :
« This work used the EM facilities at the Grenoble Instruct-ERIC Center (ISBG ; UAR 3518 CNRS CEA-UGA-EMBL) with support from the French Infrastructure for Integrated Structural Biology (FRISBI ; ANR-10-INSB-0005-02) and GRAL, a project of the University Grenoble Alpes graduate school (Ecoles Universitaires de Recherche) CBH-EUR-GS (ANR-17-EURE-0003) within the Grenoble Partnership for Structural Biology. The IBS Electron Microscope facility is supported by the Auvergne Rhône-Alpes Region, the Fonds Feder, the Fondation pour la Recherche Médicale and GIS-IBiSA. »
1CEA, Institut de Biologie Structurale Jean-Pierre Ebel, UMR5075 Grenoble France. Merci de préciser par mail les références de l’article dans lequel la plateforme est remerciée. LocalisationIBS, rez de chaussée, groupe Microscopie Electronique et Méthodes. Démarche qualitéLa plateforme est certifiée ISO9001-NFX 50-900
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