Imagerie cellulaire par microscopie électronique en transmission

Présentation

La plateforme dispose de différentes techniques permettant l’observation d’échantillons biologiques.

1. Fixation :

• Fixation chimique
• Fixation par congélation sous haute pression

2. Inclusion :

• Inclusion classique (EPON, LR White)
• Inclusion après cryo-substitution

3. Coupes :

• Coupes classiques
• Coupes cryo (Tokuyasu)

4. Marquage et coloration :

• Contre-coloration
• Immunomarquage (manuel ou automatisé)

5. Observation :

• Imagerie classique en transmission
• Tomographie

Services actuellement disponibles

- Etude morphologique

• Inclusions classiques en résine après fixation chimique, coupes ultrafines et observations.
• Inclusions en résine après congélation haute pression et cryo-substitution, coupes ultra-fines et observations.

- Immuno-localisation

• Fixation et coupes selon la technique de Tokuyasu, immuno-marquage et observations.
• Inclusion en résine après congélation haute pression et cryo-substitution, coupes ultrafines, immuno-marquage et observations.

Mots clés

Microscopie électronique cellulaire, congélation haute-pression, cryo-substitution, coupes ultra-fines, immuno-marquages.

Effectif dédié

• Benoit Gallet
• Christine Moriscot
• Daphna Fenel
• Guy Schoehn

Equipement

• Automate de cryo-fixation sous haute pression Leica EM-HPM100
• Automate de cryo-préparation Leica EM-AFS2 + EM-FSP
• (Cryo-)ultra-microtome Leica EM-UC7 + EM-FC7
• Automate d’immuno-marquage Leica EM-IGL

La plateforme propose la mise à disposition des ces appareils suivant certaines conditions.

Accessibilité et coûts

Académiques membres du PSB, autres académiques et industriels selon tarifs.

Comment nous contacter ?

ibs-plateforme-em.contact ibs.fr
B.Gallet
C.Moriscot

Echantillons

Cellules en monocouche ou en culot, bactéries ou tissus.
Les échantillons doivent respecter le niveau de sécurité L1.
Pour les échantillons de niveau L2, une fixation préalable est obligatoire.

Résultats

Les résultats obtenus permettent de :

• réaliser des études morphologiques de cellules, de tissus ou de bactéries
• localiser des protéines au niveau sub-cellulaire
• suivre le cycle d’infection de virus

Des développements sont en cours pour la mise en place de la Microscopie corrélative.

Confidentialité

Les images obtenues par la plateforme peuvent être utilisées dans des communications techniques sauf avis contraire du client.

Stockage des données

Les données sont stockées 3 ans.

Suivi valorisation

Si vous utilisez ces résultats (dans le cadre de la plateforme ou d’une collaboration) merci de rajouter :

Dans vos remerciements :

« This work used the platforms of the Grenoble Instruct-ERIC center (ISBG ; UAR 3518 CNRS-CEA-UGA-EMBL) within the Grenoble Partnership for Structural Biology (PSB), supported by FRISBI (ANR-10-INBS-0005-02) and GRAL, financed within the University Grenoble Alpes graduate school (Ecoles Universitaires de Recherche) CBH-EUR-GS (ANR-17-EURE-0003). The electron microscope facility is supported by the Rhône-Alpes Region, the Fondation Recherche Medicale (FRM), the fonds FEDER, the Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), the CEA, the University of Grenoble, EMBL, and the GIS-Infrastrutures en Biologie Sante et Agronomie (IBISA). »

Dans vos publications :

GALLET Benoit1,2,3
MORISCOT Christine1,2,3
SCHOEHN Guy1,2,3
 
1 Univ. Grenoble Alpes, Institut de Biologie Structurale (IBS), F-38027 Grenoble, France
2 CNRS, IBS, F-38027 Grenoble, France
3 CEA, DSV, IBS, F-38027 Grenoble, France

Merci préciser par mail les références de l’article dans lequel la plateforme est remerciée.

Localisation

IBS, rez de chaussée et premier étage, groupe Microscopie Electronique et Méthodes.